首先，观察尾巴是最直观的方法之一。公龟的尾巴通常又粗又长，这是因为其泄殖孔内有交接器，需要较长的尾巴来容纳和成交配行为；而母龟的尾巴则相对细短，因为其生理结构不需要如此长的尾巴。
其次，腹甲的形态差异也很关键。公龟的腹甲往往会有明显的内凹向内凹陷，这种结构在交配时能更好地贴合母龟的背甲，起到固定作用，确保交配顺利进行；母龟的腹甲则一般是平坦的，或者仅仅有轻微的凸起，这样的结构更有利于容纳和保护体内的卵。
再者，泄殖孔肛门的位置和形状是区分公母的核心标志。公龟的泄殖孔位置更靠后，距离腹甲的边缘较远，通常在尾巴的后半段，形状多为长形，便于交配时将精子传递给母龟；母龟的泄殖孔位置则更靠前，距离腹甲边缘较近，形状多为圆形或椭圆形，主要用于产卵和排泄。
综合以上几个方面的特征，通过仔细观察和对比，就能比较准确地分辨出乌龟的公母。对于成体乌龟来说，这些特征会更加明显和易于判断。