同房后20天使用验孕棒显示一条杠，通常可以排除怀孕，但并非绝对，需结合具体情况分析。
验孕棒通过检测尿液中的人绒毛膜促性腺激素hCG来判断是否怀孕。怀孕后，hCG激素由胚胎分泌，通常在受精后6-12天开始产生，并随时间快速上升。同房后20天，相当于月经周期延迟约一周左右，此时若怀孕，hCG水平一般已足够高，能被多数验孕棒准确检测。因此，一条杠阴性结果很大概率表示未怀孕。
然而，个别因素可能影响测试准确性。例如，着床时间较晚可能导致hCG分泌延迟，同房后20天时激素水平仍较低，验孕棒法检出，造成假阴性。此外，测试方法不当如使用晨尿以外的样本、读取结果超时或验孕棒灵敏度差异，也可能干扰结果。在极少数情况下，如宫外孕或早期流产，hCG水平可能偏低，导致测试不准确。
总之，同房后20天一条杠可作为排除怀孕的参考，但若月经持续延迟或身体有怀孕迹象，进一步检查以确保结果可靠。