首先，从官方设定来看，路易吉的“弟弟”身份是板上钉钉的事实。任天堂在其官方资料、游戏说明书以及后续的访谈中，多次明确指出路易吉是马里奥的弟弟。这是最直接也最具权威性的证据。毕竟，角色的设定权掌握在创作者手中，官方的背书是我们认知这对兄弟关系的基石。例如，在许多游戏的开场介绍或角色档案中，路易吉的身份描述都清晰地写着“马里奥的弟弟”。
其次，从角色的性格与定位来看，路易吉也更多地展现出“弟弟”的特质。马里奥通常被塑造为勇敢、果敢、充满领袖气质的形象，是每次冒险的绝对主角，冲在最前面。而路易吉呢？他虽然同样勇敢，但性格中往往带有一丝腼腆、谨慎，甚至有些胆小尤其是在《路易吉鬼屋》系列中。这种略带“辅助”和“跟随”的角色定位，以及相较于哥哥更为内敛的性格，与我们通常印象中弟弟的形象更为契合。他似乎总是在哥哥的光环下，默默支持，偶尔也能独当一面，但“弟弟”这个标签始终伴随着他。
再者，从名字的由来与角色的发展历程来看，路易吉的“弟弟”身份也逻辑。马里奥的名字源于早期任天堂美国 office 的一位房东 Mario Segale。而路易吉Luigi这个名字，则是为了与马里奥Mario形成呼应，在意大利语中，“Luigi”是“Louis”的变体，常被用作“小马里奥”或“马里奥的兄弟”的概念出现。在游戏发展初期，路易吉的形象甚至只是马里奥的简单调色版绿色帽子和衣服，这种“衍生”和“陪伴”的出场方式，也暗示了他作为弟弟的从属关系。随着系列的发展，路易吉逐渐拥有了更鲜明的个性和独立的冒险，但这并没有改变他是马里奥弟弟的核心设定。
综上所述，论是官方的明确声明，还是角色性格、定位以及发展历程所展现出的线索，都一致指向了路易吉是马里奥的弟弟这一结论。这对兄弟虽然性格迥异，但他们之间的羁绊和共同的冒险，早已成为游戏史上不可或缺的经典。了他们的长幼顺序，也能让我们更深入地理这两个角色的魅力所在。